Jonbyteskromatografi är ett specialfall av jonkromatografi som låter dig separera joner och polära molekyler baserat på laddningarna från de molekyler som separeras .
Denna typ av kromatografi låter dig separera nästan alla laddade molekyler, inklusive: stora proteiner , små molekyler av nukleotider och aminosyror . Jonbyteskromatografi används ofta som det första steget i proteinrening .
För jonbyteskromatografi används syntetiska polymerer, oftast baserade på polystyren och polyfenoler. De grupper som är ansvariga för jonbytesprocesser introduceras oftast som substituenter i bensenringen av monomerer. Kommersiellt tillgängliga jonbytarhartser är i form av små polymerpärlor som måste blötläggas i vatten eller annat elueringsmedel före användning [1] . Svällningen av jonbytarhartset åtföljs av en ökning av tillgängligheten av funktionella grupper i polymeren på grund av expansionen av makromolekyler av eluentmolekyler, som vid plasticeringen av polymeren. Graden av svallning av jonbytarhartset styrs av både längden på makromolekylerna och graden av tvärbindning av polymermatrisen.
Jonbyteskromatografi separerar molekyler baserat på joninteraktioner . Den stationära fasen har laddade funktionella grupper som interagerar med de analyserade joniserade molekylerna med motsatt laddning. Denna variant av kromatografi klassificeras i två typer - katjon- och anjonbyteskromatografi:
Kromatofokusering (CF) är en jonbyteskromatografimetod baserad på eluering med en intern (skapad inuti kolonnen) pH-gradient. För närvarande används två tekniker för bildandet av pH-gradienter - "klassisk" kromatofokusering och induktion. CP används vanligtvis för att separera biologiska objekt - proteiner, peptider, aminosyror, mer sällan azofärgämnen och andra zwitterjoniska föreningar. I början av 1990-talet föreslog P. N. Nesterenko och A. V. Ivanov en metod för koncentration och separation av övergångsmetaller på en enda kolonn med hjälp av kromatofokuseringstekniken. Traditionellt, för dessa ändamål, bildas fallande pH-gradienter på anjonbytarsorbenter.