Chetverin, Alexander Borisovich
Alexander Borisovich Chetverin (född 20 maj 1953 ) är en rysk molekylärbiolog , doktor i biologiska vetenskaper sedan 1995 , professor i molekylärbiologi, motsvarande medlem av Ryska vetenskapsakademin inom sektionen fysikalisk och kemisk biologi sedan 30 maj 1997 , chef för laboratoriet för viral RNA- biokemi vid Institute of Protein RAS sedan 1998 , student hos akademiker Spirin A.S.
Vetenskaplig verksamhet
Chetverin arbetade inom området genteknik (skapande av en ny typ av vektorer för kloning av matrix ribonukleinsyra - mRNA ).
1991 , vid Institute of Protein RAS, uppfann Chetverin och hans kollegor den molekylära kolonimetoden , vars essens är att när de lämpliga förhållandena skapas, multipliceras RNA eller DNA i ett gelskikt , på grund av vilket avkomman från varje molekylen bildar en koloni och sprider sig inte genom reaktionsvolymen. Eftersom gelmatrisen förhindrar konvektion av vätskan som finns i den och begränsar diffusionen av nukleinsyror , sprids inte förökningsprodukterna i reaktionsmediet, utan bildar mer eller mindre kompakta molekylära kolonier, som kolonier av bakterier som växer på ytan av näringsämnen agar. Om förökningen utförs i ett tunt lager av gel, bildas ett tvådimensionellt mönster av kolonier, som var och en representerar ett flertal kopior ( kloner ) av en original RNA- eller DNA-molekyl.
Metoden för molekylära kolonier gjorde det möjligt att fastställa källan till mallar i den så kallade "malllösa" RNA-syntesen utförd av Qβ-replikas (RNA-beroende RNA-polymeras av bakteriofag Qβ [1] ) i ett cellfritt system, samt att studera extremt sällsynta rekombinationsreaktioner in vitro mellan RNA-molekyler, vilket ledde till upptäckten av RNA-molekylers förmåga att spontant omarrangera sina nukleotidsekvenser under fysiologiska förhållanden . Dessa experiment ger indirekta bevis till förmån för RNA-världshypotesen .
Chetverins laboratorium har också utvecklat en mängd praktiska tillämpningar av den molekylära kolonimetoden, inklusive extracellulär kloning och genscreening , såväl som digital diagnostik, som ger tillförlitlig detektering av en DNA-molekyl och två RNA-molekyler i 100 µl helblod , vilket möjliggör för ultrakänslig diagnostik av virala och onkologiska sjukdomar .
Utmärkelser och priser
1995 gjorde Chetverin A.B. blev vinnaren av A. N. Belozersky -priset för en serie arbeten om skapandet av ett cellfritt system för replikering, uttryck och kloning av RNA.
Publikationer
Chetverin A.B. är medförfattare till följande publikationer:
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2002. Exakt diagnos med molekylära kolonier. Molekyl. biologi. 36.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2003. Att övervinna problemen med PCR-diagnostik med metoden för molekylära kolonier. Molekyl. medicinen. 2.
- Chetverina E.V., Chetverin A.B. 2008. Nanokolonier: upptäckt, kloning och analys av enskilda molekyler. Framgång biol. kemi. 48.
- Chetverin AB, Chetverina HV 2008. Molekylär koloniteknik: ett nytt verktyg för biomedicinsk forskning och klinisk praktik. Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 82.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Munishkin AV Om naturen hos spontan RNA-syntes genom Qb-replikas // J. Mol. Biol. 1991. V. 222. S. 3-9.
- Chetverina HV, Chetverin AB Kloning av RNA-molekyler in vitro // Nukleinsyraforskning. 1993. V. 21. P. 2349-2353. [2] PMID 7685078 .
- Chetverina HV, Demidenko A.A., Ugarov VI, Chetverin AB Spontana omarrangemang i RNA-sekvenser // FEBS Letters. 1999. V. 450. S. 89-94.
- Munishkin AV, Voronin LA, Ugarov VI, Bondareva LA, Chetverina HV och Chetverin AB Effektiva mallar för Qb-replikas bildas genom rekombination från heterologa sekvenser. - J. Mol. Biol., 1991, v. 221, sid. 463-472.
- Morozov I.Yu., Ugarov VI, Chetverin AB och Spirin AS Synergism vid replikering och translation av budbärar-RNA i ett cellfritt system. - Proc. Natl. Acad. sci. USA, 1993, v. 90, sid. 9325-9329.
- Chetverin AB och Kramer FR Oligonukleotidmatriser: Nya koncept och möjligheter. - Bio/Technology, 1994, v. 12, sid. 1093-1099.
- Chetverin AB och Spirin AS Replikerbara RNA-vektorer: Utsikter för cellfri genamplifiering, uttryck och kloning. - Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 1995, v. 51, sid. 225-270.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Demidenko AA och Ugarov VI Nonhomolog RNA-rekombination i ett cellfritt system: bevis för en transesterifieringsmekanism styrd av sekundär struktur. – Cell, 1997, v. 88, sid. 503-513.
- Chetverin AB och Chetverina HV Metod för amplifiering av nukleinsyror i fasta medier. US Patent 5, 1997, v. 616, sid. 478.
- Chetverin AB Pusslet med RNA-rekombination. FEBS Lett., 1999, v. 460, sid. 1-5.
- Gmyl AP, Belousov EV, Maslova SV, Khitrina EV, Chetverin AB och Agol VI Icke-replikativ RNA-rekombination i poliovirus. - J. Virol., 1999, v. 73, sid. 8958-8965.
- Vasilyev NN, Kutlubaeva ZS, Ugarov VI, Chetverina HV, Chetverin AB Ribosomalt protein S1 fungerar som en termineringsfaktor i RNA-syntes av Qβ-fagreplikas. - Nat. Communi., 2013, v. 4, artikelnummer 1781.
Patent
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1995. En metod för att föröka nukleinsyror, en metod för deras uttryck och ett medium för deras implementering. RF patent nr 2048522.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. En metod för kloning av nukleinsyror. RF patent nr 2114175.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. En metod för att diagnostisera nukleinsyror. RF patent nr 2114915.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1997. Metod för amplifiering av nukleinsyror i fasta medier. US-patent 5,616,478.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Metod för amplifiering av nukleinsyror i fasta medier och dess tillämpning för nukleinsyrakloning och diagnostik. US-patent 5,958,698.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Fast medium för amplifiering och uttryck av nukleinsyror som kolonier. US patent 6 001 568.
Källor