Isotakofores

Isotachofores (ITP) är en metod för att separera olika typer av joner baserat på deras rörlighet i ett elektriskt fält . Med ITF migrerar alla typer av joner i samma riktning och bildar en uppsättning zoner som är i ett jämviktstillstånd och rör sig med samma hastighet.

Metodens teoretiska grunder

ITF-metoden är baserad på ett system som består av tre olika elektrolyter , förenade av en gemensam motjon:

Om en elektrisk ström passerar genom detta system kommer anjonerna att arrangeras i serie i enlighet med deras elektroforetiska rörlighet, vilket leder till anodområdet , sluter i katodområdet , resten mellan dem i form av smala zoner med tydlig koncentration gränser. Bredden på enskilda zoner i slutet av processen motsvarar den absoluta mängden av en eller annan anjon i blandningen .

Eftersom de enskilda zonerna är ordnade i serier. de är praktiskt taget i kontakt, därför införs en buffert som innehåller en anjon med mellanliggande rörlighet i testprovet , vars zon kommer att integreras i den resulterande sekvensen och trycka på zonerna för de anjoner som studeras . Dessa hjälpzoner kallas spacers - separatorer, vars funktioner utförs av bäraramfolyter som används i IEF- metoden . En egenskap hos ITF-metoden är att processen åtföljs av koncentrationen av zoner, vars effekt leder till en upplösning som är jämförbar med och till och med överlägsen separation med IEF- metoden . Resultaten av separationen av blandningar med ITF-metoden registreras på inspelningsbandet i form av en graf över mätningen av tre parametrar:

Instrument för isotachofores

Analytisk isotakofores utförs i en kapilläranordning för isotakofores, i en teflonkapillär med en innerdiameter på 0,5 mm.

Preparativ isotakofores utförs i en polyakrylamidgelkolonn .

Tillämpning av isotachofores

  1. Högupplöst analytisk separation (μg) av peptider , proteiner , nukleotider , organiska syror , metalljoner ( delvis isotoper ).
  2. Preparativ separation av proteiner (d).
  3. Ansamling i form av en smal zon av spårmängder av ämnen (µg) från stora provvolymer på grund av effekten av koncentration.
  4. Bestämning av elektroforetisk rörlighet.

Litteratur

K. Geckeler, H. Eckstein. Analytiska och preparativa laboratoriemetoder: Ref. utg.: Perev. med honom. — M.: Kemi, 1994. — 416 sid. sjuk.

Se även