Blotting

Blotting (från engelska  Blot ) är det allmänna namnet på molekylärbiologiska metoder för att överföra vissa proteiner eller nukleinsyror från en lösning som innehåller många andra molekyler till någon slags bärare ( nitrocellulosa , PVDF eller nylonmembran ) för efterföljande analys. I vissa fall utsätts molekylerna preliminärt för gelelektrofores , i andra överförs de direkt till membranet. Efter blotting visualiseras molekylerna med olika metoder:

• Färgning (till exempel färgning av proteiner med silver).
• Autoradiografisk avbildning.
• Specifik märkning med immunokemiska metoder eller hybridisering.

Klassificering

Klassificering av metoder enligt ämnet som studeras:

• Southern blotting är bestämningen  av DNA-sekvensen i ett prov.
• Southwestern blotting ( eng.  Southwestern blot ) - bestämningen av proteiner associerade med DNA.
• Northern blotting ( engelska  Northern blot ) - bestämning av RNA-sekvensen i provet.
• Western blotting ( eng.  Western blot ) - bestämning av specifika proteiner i provet.
• Eastern blotting ( engelska  Eastern blotting ) - bestämning av post-translationella modifieringar av proteiner .

Metodnamn

Southern blotting-metoden är uppkallad efter författaren till metoden, Edwin Southern . De återstående namnen gavs först inofficiellt i analogi (efternamnet kan översättas till "södra"), sedan fick de officiell status [1] . Till skillnad från de andra är namnet "Southern blotting" versaler.

Se även

• Immunkemi
• Elektrofores i polyakrylamidgel
• Autoradiografi

Anteckningar

1. ↑ Murray R., Grenner D., Mace P., Rodwell W. Human Biochemistry. M.: Mir, 1993