Näringsmedium
Den aktuella versionen av sidan har ännu inte granskats av erfarna bidragsgivare och kan skilja sig väsentligt från
versionen som granskades den 27 december 2021; kontroller kräver
6 redigeringar .
Ett näringsmedium är ett enkomponent- eller multikomponentsubstrat som används för odling av mikroorganismer eller cellkulturer av högre organismer.
Krav på näringsmedia
- vara näringsrik , det vill säga innehålla i lättsmält form alla ämnen som behövs för att tillgodose närings- och energibehov. När man odlar ett antal mikroorganismer införs tillväxtfaktorer i media - vitaminer, vissa aminosyror som cellen inte kan syntetisera.
- har en optimal koncentration av vätejoner - pH , eftersom endast med en optimal reaktion av miljön som påverkar skalets permeabilitet kan mikroorganismer absorbera näringsämnen.
För de flesta
patogena bakterier är en svagt alkalisk miljö (pH 7,2-7,4) optimal. Undantaget är
vibrio cholerae - dess optimala är i den alkaliska zonen (pH 8,5-9,0) och det
orsakande medlet för tuberkulos , som behöver en något sur reaktion (pH 6,2-6,8).
Så att under tillväxten av mikroorganismer, sura eller alkaliska produkter av deras vitala aktivitet inte ändrar pH, måste medierna ha buffring , det vill säga innehålla ämnen som neutraliserar metaboliska produkter.
- vara isotonisk mot den mikrobiella cellen; det vill säga det osmotiska trycket i mediet måste vara detsamma som inuti cellen. För de flesta mikroorganismer är den optimala miljön 0,5 % natriumkloridlösning .
- vara steril , eftersom främmande mikrober förhindrar tillväxten av mikroben som studeras, bestämningen av dess egenskaper och förändrar miljöns egenskaper.
- täta medier ska vara fuktiga och ha en optimal konsistens för mikroorganismer.
- har en viss redoxpotential , det vill säga förhållandet mellan ämnen som donerar och tar emot elektroner, uttryckt med RH 2 index . Till exempel reproducerar anaerober vid RH 2 inte högre än 5 och aerober vid RH 2 inte lägre än 10.
- vara så enhetlig som möjligt , det vill säga innehålla ett konstant antal enskilda ingredienser.
Det är önskvärt att medierna är transparenta - det är bekvämare att övervaka tillväxten av kulturer, det är lättare att märka föroreningen av miljön av främmande mikroorganismer.
Klassificering
- För originalingredienser:
- naturliga medier - framställda av produkter av animaliskt och vegetabiliskt ursprung (kött, ascites, benmjöl, foderjäst, blodproppar, etc.)
- syntetiska medier - framställda av vissa kemiskt rena organiska och oorganiska föreningar, tagna i exakt specificerade koncentrationer och lösta i dubbeldestillerat vatten .
- Beroende på graden av beredskap:
- färdiga näringsmedia (i petriskålar, i flaskor)
- torra blandningar
- Efter konsistens (densitetsgrad):
- flytande (buljong)
- halvflytande
- tät
Täta och halvflytande medier skiljer sig från flytande i närvaro av ett gelningsmedel ( agar-agar , mer sällan gelatin). Dessutom används koagulerade ägg- eller vassleproteiner, potatis och silikagelmedia som fasta medier. Vissa mikroorganismer använder gelatin som näringsämne - när de växer blir mediet flytande.
- I sammansättning:
- enkelt: kött-peptonbuljong (MPB), kött-peptonagar (MPA), näringsrikt gelatin,
- komplex - multikomponentmedia som kan innehålla aminosyror, vitaminer, spårämnen och andra ämnen.
- Enligt överenskommelse:
- de viktigaste används för odling av de flesta mikroorganismer, till exempel MPB, MPA, buljong , chokladagar , peptonvatten.
- special - används för att isolera och odla mikroorganismer som inte växer på enkla medier.
- elektiv (selektiv) - tjänar till att isolera en viss typ av mikrober, vars tillväxt de gynnar, försenar eller undertrycker tillväxten av relaterade mikroorganismer. Medierna blir valbara när vissa antibiotika, salter och pH-förändringar läggs till dem. Flytande elektiva medier kallas ackumuleringsmedia .
- differentialdiagnostik - låter dig skilja en typ av mikrob från en annan genom enzymatisk aktivitet.
- transport - utformad för primär sådd och transport av testmaterialet.
Förberedelse av media
Redskap för matlagningsmiljöer
Kärl för beredning av media bör inte innehålla främmande ämnen, såsom alkalier som frigörs av vissa typer av glas, eller järnoxider, som kan komma in i mediet när det kokas i rostiga kastruller. Det är bättre att använda skålar av glas, emalj eller aluminium. Före användning måste disken tvättas noggrant, sköljas och torkas. Nya glasvaror kokas preliminärt i 30 minuter i en 1-2% lösning av saltsyra , varefter den sköljs i rinnande vatten i en timme.
Råvaror
De första råvarorna för beredning av de flesta medier är produkter av animaliskt och vegetabiliskt ursprung, såväl som färdiga halvfabrikat.
Matlagningssteg
- bryggning : media kokas över öppen eld, bain-marie , autoklav eller kokare.
- pH-inställning : grovt gjort med indikatorpapper , för noggrann bestämning använd en potentiometer eller komparator. Under steriliseringen sjunker pH med 0,2, så en mer alkalisk lösning bereds först.
- klarning utförs om mediet blir grumligt eller mörkt under tillagningen. För detta används äggprotein eller blodserum.
- filtrering av flytande och smälta gelatinösa medier utförs genom våta papper eller tygfilter. Filtrering av agarmedia är svårt - de stelnar snabbt. Vanligtvis filtreras de genom ett bomullsgasfilter.
- häll mediet i högst ¾ av behållaren, eftersom pluggarna kan bli blöta under steriliseringen och media förlorar sin sterilitet.
- sterilisering : steriliseringsläget beror på mediets sammansättning och anges i dess recept.
- kontrollera
- för att kontrollera mediets sterilitet placeras de i en termostat i 2 dagar , varefter de betraktas.
- kemisk kontroll bestämmer slutligen pH, innehållet av totalt och aminokväve, pepton, klorider.
- för biologisk kontroll inokuleras flera prover av mediet med speciellt utvalda kulturer, och deras tillväxt används för att bedöma mediets näringsegenskaper.
Typer av näringsmedia
- Medium typ AGV (TU 9229-083-00419785-97).
- Agar jäst-mjölk-salt medium (ADMS)
- Baird-Parkers medium (agar)
- Blaurock medium (agar)
- Bushnell-Haas medium (agar)
- Wilson-Blair medium (agar)
- Hamburg medium (agar)
- Gause-1 medium (agariserat)
- Carey-Blair medium (agar) eller Carey-Blair medium (Carey-Blair).
- Medium Kitt Tarozzi (agar)
- Lowenstein-Jensen medium.
- Onsdag Levin-GRM
- Leonians medium (agar, används inom mykologi)
- McConkeys medium (agar)
- Murashige-Skoog medium (agar)
- Muller-Hinton medium (tät)
- Medium MPC-2 (agar)
- Medium typ MRS (agar) (GOST 51331-99) - latinsk förkortning av föregående medium
- Medium typ Neogen
- Cattail medium (agar)
- Sabourauds medium (agar, dextros , används inom mykologi, SDA)
- Onsdag Smirnova A. M.
- Sotons medium (agar)
- Medium SR-15 (agar)
- Gatans medium (agar)
- Stuarts medium (transport)
- Trypton sojaagar (TSA) Medium
- Hayflick Medium (agar) eller Hayflick Liquid Medium
- Chapeks medium (agar)
- Schenck-Hildebrandt medium
- Amies Medium (transport) eller Amies Liquid Medium
- Endo medium (agar)
- Ashby medium (agar) [1] [2]
- Miljö LB
Bilder
-
Provrör med flytande näringsmedium (vänster 6) för identifiering av mikroorganismer genom deras förmåga att byta media
-
Provrör med tätt lutande näringsmedium (järnagar med tre sockerarter) inokulerade med olika mikroorganismer
-
En koloni av svampen microsporia på ett lutande tätt tillväxtmedium
-
Renkultur av Escherichia coli på ett tätt valfritt näringsmedium (Endo-medium) på en petriskål
-
Ren kultur av mjältbrand på ett tätt valbart näringsmedium ( blodagar ) på en petriskål
-
Petriskålar med fast odlingsmedium
Se även
Anteckningar
- ↑ Smirnov A. M. Tillväxt och metabolism av isolerade rötter i en steril kultur. M.: Nauka, 1970. 455 sid.
- ↑ Butenko R.G. Kultur av isolerade vävnader och fysiologi av växtmorfogenes. M.: Nauka, 1964. 272 s.
Litteratur
- Zamchuk L. A. Kulturmedia Arkiverad 18 januari 2021 på Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , 3:e upplagan. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 19.
- Kalina G.P. Syntetiska näringsmedier Arkiverad 11 augusti 2017 på Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 23.
- Birger M. O. Differentiella diagnostiska medier Arkivexemplar av 29 augusti 2017 på Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 7.
- Belokrysenko S. S. Bakteriekultur Arkiverad 9 december 2020 på Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 2.
- Belokrysenko S. S. Hemoculture Arkivexemplar daterad 12 juli 2017 på Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 5.
- Belokrysenko S. S. Biological assay in microbiology Arkivexemplar daterad 11 juli 2017 på Wayback Machine // Big Medical Encyclopedia , 3rd ed. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 3.
- Ignatova T. N., Pospelova T. V., Gubin V. A., Dobrynin Ya. V., Chertkov I. L. Cell- och vävnadskulturer (näringsmedia för cell- och vävnadskulturer) Arkivexemplar av 26 oktober 2020 på Wayback Machine // Great Medical Encyclopedia , 3:e upplagan. — M.: Sovjetiskt uppslagsverk. - T. 12.
- [bse.sci-lib.com/article110808.html Titer av bakterier] // Stora sovjetiska uppslagsverket : [i 30 volymer] / kap. ed. A. M. Prokhorov . - 3:e uppl. - M . : Soviet Encyclopedia, 1969-1978.