Storleksexklusionskromatografi

Gelfiltrerings- eller storleksexklusionskromatografi (sikt, gelpermeation, gelfiltreringskromatografi) är en typ av kromatografi , under vilken molekyler av ämnen separeras i storlek på grund av deras olika förmåga att penetrera in i den stationära fasens porer. I det här fallet är de största molekylerna (med högre molekylmassa ) som kan tränga in i det minsta antalet porer i den stationära fasen de första som lämnar kolonnen. Ämnen med små molekylstorlekar, som fritt tränger in i porerna, kommer ut sist. Till skillnad från adsorptionskromatografi förblir den stationära fasen kemiskt inert under gelfiltrering och interagerar inte med de ämnen som ska separeras.

Princip

En provlösning införs i kolonnen , vars volym är begränsande för kvaliteten på kromatografi. För analytiska separationer bör den inte överstiga 0,1 % av CV (total kolonnvolym), och för preparativ rening bör den inte överstiga 8-10 % av CV. Kolonnen är packad med pulver, vars partiklar eller granulat har porer med en viss diameter. Makromolekylära ämnen som inte ingår i porerna passerar mellan granulerna, så deras retentionsvolym är lika med kolonnens volym minus volymen av den stationära fasen (den så kallade fria volymen ). De eluerar först. Molekyler av medelstorlek passar in i sorbentens porer, men inte helt. Därför är deras retentionsvolym något högre än den fria volymen. De eluerar tvåa. De minsta molekylerna kommer fritt in i porerna tillsammans med lösningsmedelsmolekyler. Därför är deras retentionsvolym i kolonnen mycket högre än den fria volymen och närmar sig kolonnens totala volym (dvs. 100 % CV). De eluerar sist.

Sorbenter

Gel är ett heterogent system där den mobila fasen (vanligtvis vatten) alltid finns inuti porerna i en stationär eller fast fas, kallad gelmatrisen.

Lågtryck

Högtryck