Kromatografikolonn - en anordning för kromatografi , som används både för manuellt arbete och som en del av en speciell enhet, en kromatograf .
I en kromatografikolonn separeras den initiala flerkomponentblandningen i en serie binära blandningar bestående av en vätske- eller bärargas (för gaskromatografi ) och en av komponenterna som ska separeras. Separation kan ske både på grund av bildandet av tillfälliga bindningar mellan de ämnen som ska separeras och den stationära fasen av kolonnen ( adsorptionskromatografi ), och enligt andra principer (till exempel storleksexklusionskromatografi ). Mer exakt ställs värdena för volymen eller tiden för utträde av varje komponent från kolumnen in under kalibreringen .
Kolonnen kännetecknas av det material som den stationära fasen består av, den inre diametern och längden. Storleken på kolonnerna beror på mängden ämnen som ska separeras och typen av kromatografi. På kolonner av olika kaliber kan både mikrogram och kilogram av olika ämnen separeras.
Det finns två huvudmetoder för att packa kolonner med fasta ämnen, torra och våta. I det första fallet fylls kolonnen först med torrt pulver, varefter den mobila fasen (vätska eller gas) passeras igenom. I det andra fallet fylls kolonnen med en suspension av fyllmedel i den mobila fasen. Om den mobila fasen är flytande, bör det i båda fallen säkerställas att det inte finns några luftbubblor i den färdiga kolonnen, vilket kan påverka kvaliteten på kromatografin eller helt blockera den. Dessutom finns det alltid risk för kolonnfel på grund av otillåtna ämnen (olösliga ämnen eller för aktiva molekyler som täpper till kolonnkanalen) som inte elimineras under provberedningen .
Som en fast fas kan material som silikagel , aluminiumoxid , mikrokristallin cellulosa , agaros och andra material användas, i synnerhet framställda genom speciell bearbetning av cellulosa eller agaros för storleksuteslutning , jonbyte eller affinitetskromatografi .
Under kromatografi lämnar de individuella komponenterna i blandningen som appliceras på kolonnen den i olika hastigheter. De samlas in i fraktioner som bestämmer koncentrationen av de förväntade ämnena i varje fraktion. Färgade ämnen kan också ses genom kolonnens glasväggar.
| Kemiska separationsmetoder | |
|---|---|