Amplifiering (molekylärbiologi)

Amplifiering ( lat.  amplificatio  - amplifiering, ökning), i molekylärbiologi  - processen för bildning av ytterligare kopior av kromosomala DNA- sektioner , som i regel innehåller vissa gener eller segment av strukturell heterochromatin . Amplifiering kan vara ett svar från celler på en selektiv stimulans (till exempel under verkan av metotrexat ). Amplifiering är en av mekanismerna för aktivering av onkogener under tumörutveckling, till exempel N-myc-onkogenen under utvecklingen av neuroblastom. Amplifiering är också ackumulering av kopior av en specifik nukleotidsekvens under PCR -polymeraskedjereaktion [1] .

Fördubblingsprocessen

Den isolerade DNA-molekylen värms upp, sedan delas den i två strängar. Lägg till primers . Blandningen av DNA och primers kyls sedan. I detta fall binder primrarna, om den önskade genen finns i DNA-blandningen, till dess komplementära regioner. Därefter tillsätts DNA-polymeras och nukleotider till blandningen av DNA och primer . Ställ in den optimala temperaturen för DNA-polymerasets funktion (37 °C). Under dessa förhållanden, i fallet med DNA-komplementaritet för genen och primern , är nukleotider fästa till 3'-ändarna av primrarna, vilket resulterar i syntesen av två kopior av genen. Därefter upprepas cykeln igen, medan mängden DNA i genen kommer att fördubblas varje gång. Reaktionen utförs i speciella enheter - förstärkare .

Anteckningar

  1. Amplifiering (amplifiering) - Processen för bildandet av ytterligare kopior av sektioner av kromosomalt DNA, som i regel innehåller vissa gener eller segment av strukturell heterochr ... . Hämtad 3 november 2011. Arkiverad från originalet 6 januari 2011.