Bradfordmetoden är en av de kolorimetriska metoderna för kvantitativ bestämning av proteiner i lösning. Föreslog av biokemisten Marion M. Bradford 1976 . [1] [2] M. Bradfords artikel i tidskriften Analytical Biochemistry , ägnad metoden för kvantitativ bestämning av protein i lösning, är en av de mest citerade vetenskapliga artiklarna i världen.
Metoden är baserad på reaktionen av färgämnet Coomassie Brilliant Blue G-250 med arginin och hydrofoba aminosyrarester . Den bundna formen är blå med ett absorptionsmaximum vid 595 nm. Sålunda är ökningen i ljusabsorption av lösningen vid en våglängd av 595 nm proportionell mot mängden protein i lösningen. [3]
Metoden ger ett bra värde på proteinkoncentrationen i intervallet från 2 µg/ml till 120 µg/ml (inom dessa gränser observeras ett linjärt beroende av absorptionsökningen på koncentrationen, i allmänhet beror metodens känslighet på förhållandet mellan koncentrationerna av proteinet som ska bestämmas och färgämnet: ju mer färgämne, desto känsligare metoden ), mindre "nycker" jämfört med Lowry-metoden .