Romanovsky-Giemsa färgning
Den aktuella versionen av sidan har ännu inte granskats av erfarna bidragsgivare och kan skilja sig väsentligt från versionen som granskades den 15 juli 2019; kontroller kräver 2 redigeringar .Romanovsky - Giemsa- färgning är en cytologisk metod för färgning av mikroorganismer , cellstrukturer och vävnader av olika typer (inklusive blod ) för undersökning med ljusmikroskopi . Föreslagen 1904 [1] av Gustav Giemsa . I författarens version är namnet på färgämnet "Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung" (Giemsa lösning för färgning enligt Romanovsky) [2] . Det färgar acidofila formationer i olika nyanser av rött, basofila formationer i färger från lila till blått.
Förbereder färgämnet
Innan utstrykarna färgas ut späds det färdiga flytande färgämnet med en hastighet av 1-2 droppar av färgämnet per 1 ml destillerat vatten. Utstrykarna färgas under 20-25 minuter vid 37°C i en fuktig kammare (sluten petriskål med ett fuktat filter i botten). Efter färgning tvättas utstrykarna i rinnande vatten, torkas i luft och undersöks genom nedsänkning i olja.
Romanovsky-Giemsa-färgblandningen, som är baserad på Romanovsky-Wright-färgen , i form av ett pulver (kommersiellt färgämne) löses i en blandning av lika volymer metylalkohol och glycerin (800 mg färgämne per 100 ml lösningsmedel). ). Färgämnet löser sig dåligt, så det är bättre att mala det med ett lösningsmedel i en mängd av 300 mg per 100 ml, och sedan, under omrörning, tillsätt färgämnet tills önskad koncentration erhålls. Beredningen av färgämnet tar ofta flera dagar. Det är viktigt att använda kemiskt ren metylalkohol och glycerin som lösningsmedel, eftersom föroreningar försämrar färgämnets egenskaper. Istället för metylalkohol kan 100 % etylalkohol användas. Den beredda färgblandningen förvaras på en sval torr plats i ett tätt tillslutet kärl.
Giemsa speciell standardlösning
- Färgämnes sammansättning:
Färgningsteknik
- Utstryk fixerade i metylalkohol färgas med en lösning (1 ml av den färdiga flytande färgen + 2 ml av den grundläggande buffertlösningen + 47 ml destillerat vatten) i 40-120 minuter (färgningstiden väljs empiriskt). Fosfatbuffert används, men buffertens pH beror på typen av utstryk: för ett benmärgsutstryk - 5,8-6,0, för ett blodutstryk - 6,4-6,5, för detektion av protozoer - 6,8, malariaplasmodium - 7, 0-7,2.
- Skölj i destillerat vatten, torka och undersök genom nedsänkning.
Färgläggningsresultat
Bakterier färgar lila-röd, cellcytoplasman blå, kärnor röda. När man färgar protozoer blir deras cytoplasma blå och kärnorna blir rödvioletta.
Resultat av färgning av blodutstryk
- lymfocyternas cytoplasma färgar blåblått, deras kärnor - i färger från intensivt lila till violett;
- cytoplasman av monocyter är färgad i en grumlig blågrå färg, deras kärnor - i en ljusare lila-röd, delikat azurofil granularitet;
- granuler av basofiler är färgade i en intensiv blåviolett färg;
- granulat av eosinofiler färgar orange-rosa;
- granulat av neutrofiler är färgade i färger från lila till violett;
- leukocyternas kärnor är lila-röda till färgen med en tydligt synlig kromatinstruktur; nukleolerna är väl särskiljda;
- trombocytgranulomerer färgade röda, hyalomerer färgade blå;
- rosa färg på hemoglobin .
Se även
Anteckningar
- ↑ Giemsa G. Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung. (tyska) // Centralbl f Bakt etc: magazin. - 1904. - Bd. 37 . - S. 308-311 .
- ↑ Bezrukov A. V. Färgläggning enligt Romanovsky: på frågan om prioritet / På 120-årsdagen av upptäckten av Romanovsky-effekten. - 12 s. (inte tillgänglig länk)
 Ordböcker och uppslagsverk |
|
|---|