Fenylmetylsulfonylfluorid

Fenylmetansulfonylfluorid (PMSF)
Allmän
Chem. formel C 7 H 7 FO 2 S
Termiska egenskaper
Temperatur
 •  smältning 93°C [1]
Klassificering
Reg. CAS-nummer 329-98-6
PubChem 4784
Reg. EINECS-nummer 206-350-2
LEDER   C1=CC=C(C=Cl)CS(=O)(=O)F
InChI   InChI=1S/C7H7FO2S/c8-11(9,10)6-7-4-2-1-3-5-7/h1-5H,6H2YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N
RTECS XT8040000
CHEBI 8102
ChemSpider 4620
Data baseras på standardförhållanden (25 °C, 100 kPa) om inget annat anges.
 Mediafiler på Wikimedia Commons

Inom biokemi är fenylmetansulfonylfluorid eller fenylmetylsulfonylfluorid ( PMSF , förkortning för fenylmetansulfonylfluorid eller fenylmetylsulfonylfluorid ) en serinproteashämmare som används i stor utsträckning vid isolering av cellproteinextrakt från olika cellproteinextrakt . PMSF hämmar inte alla serinproteaser [ källa? ] . Det bryts ner snabbt i vatten, så stamlösningar (”stock”) tenderar att använda vattenfri etanol , isopropanol , majsolja eller DMSO som lösningsmedel . Hämning av proteolytiska enzymer sker vid PMSF-koncentrationer inom intervallet 0,1 till 1 mM . Halveringstiden i vattenlösningar (vid 25°C) är 110 minuter vid pH 7, 55 minuter vid pH 7,5 och 35 minuter vid pH 8. [2]

PMSF binder specifikt till serinrester på det aktiva stället i serinproteaser, men binder inte till några andra serinrester i enzymet . Detta är en konsekvens av hyperaktiviteten hos denna serinrest orsakad av specifika miljöförhållanden i enzymets aktiva ställe. Eftersom PMSF är kovalent bundet till enzymet kan komplexet visualiseras med användning av röntgenkristallografi ; därför kan PMSF användas som en kemisk märkning för att identifiera serin vid det aktiva stället i enzymet.

Enzym_(aktiv)-Ser-OH + F-SO 2 CH 2 C 6 H 5 → Enzym-Ser-O-SO 2 CH 2 C 6 H 5 + HF Serinproteas + PMSF → irreversibelt enzym-PMS-komplex + HF

LD 50 är mindre än 500 mg/kg [3] . PMSF är en cytotoxisk kemikalie och bör endast hanteras i ett dragskåp.

Anteckningar

  1. ↑ Bradley J. , Williams A. , Andrew SID Lang Jean-Claude Bradley Open Melting Point Dataset // Figshare - 2014. - doi:10.6084/M9.FIGSHARE.1031637.V2
  2. ↑ GT James. Inaktivering av proteashämmaren fenylmetylsulfonylfluorid i buffertar   // Analytisk biokemi : journal. - 1978. - Vol. 86 , nr. 2 . - s. 574-579 . - doi : 10.1016/0003-2697(78)90784-4 . — PMID 26289 .
  3. ↑ Roche tillämpad vetenskap . Den kompletta guiden för proteashämning. https://iti.stanford.edu/content/dam/sm/iti/documents/himc/immunoassays/ProteaseInhibitionGuide.pdf Arkiverad 17 maj 2017 på Wayback Machine

Se även

Serpiner är en grupp serinproteashämmande proteiner .

Externa länkar