L-asparaginas ( EC 3.5.1.1 ), L-asparaginamidohydrolas är ett enzym av hydrolasklassen som katalyserar hydrolysen av främst L-asparagin . Det används som ett antitumörcytostatiskt medel vid behandling av vissa leukemier [1] [2] , såväl som vid matlagning [3] .
Producerad med Escherichia coli eller Erwinia chrysanthemi [4] .
Asparaginas är en homotetramer med fyra ställen med en molekylvikt som sträcker sig från 140 till 150 kDa enligt olika källor. Varje monomer består av cirka 330 aminosyrarester, som bildar 14 β-veck och 8 α-helixar , vilka bildar två lätt urskiljbara domäner : en större N-terminal och en C-terminal. Det aktiva stället bildas mellan monomererna. Trots det faktum att dimeren redan har allt som behövs för katalys , är endast den tetramera formen aktiv för de flesta bakteriella asparginaser [5] .
Ett flertal arbeten som utförts för att klargöra verkningsmekanismen för L-asparaginas har visat en tvåstegs pingismekanism, samma som serinproteas med det enda undantaget att inte serin (Ser), utan treonin (Thr ) fungerar som en nukleofil i L-asparaginas. ) lokaliserad i regionen av den mobila slingan av det aktiva stället. Enligt positionen för den mobila slingan särskiljs två huvudkonformationer: stängd och öppen. Bindningen av substratet till det aktiva stället initierar övergången av den mobila slingan till en sluten konformation, och för därigenom den katalyserande nukleofilen närmare substratet [5] .
Klyvning av asparagin med asparaginas leder till en minskning av dess koncentration i det extracellulära utrymmet. I normala celler aktiveras asparaginsyntetas för att återställa asparaginnivåerna ; i leukemiceller reduceras uttrycket av asparaginsyntetas. Sålunda kan asparaginas, på grund av klyvningen av asparagin, blockera proteinsyntesen och därigenom orsaka apoptos av tumörceller [2] [6] .