Spermogram (från andra grekiska σπέρμα - frö och γράμμα - rekord) är en analys av ejakulat (spermier) som används inom medicin för att fastställa fertiliteten hos en man och identifiera möjliga sjukdomar i reproduktionssystemet. Ett spermogram ordineras för klagomål från ett gift par om infertilitet , ett spermogram är också indicerat för spermadonatorer och personer som planerar frysning av spermier .
Huvudkomponenten i spermogrammet är den mikroskopiska analysen av ejakulatet, där egenskaperna hos de cellulära elementen i spermierna bestäms, nämligen: antalet spermier, spermiers motilitet, morfologiska egenskaper hos spermier, antalet och typer av leukocyter, antalet och typerna av omogna celler av spermatogenes, etc. Dessutom makroskopiska ejakulatparametrar: spermavolym, färg, flytningstid och ejakulatviskositet, pH. Ibland görs en ytterligare biokemisk analys av ejakulatet, där innehållet av fruktos , zink , alfa-glukosidas , L-karnitin i sperman oftast undersöks .
Idéer om vilka egenskaper en fertil mans utlösning har förändrats över tiden. Med ökningen av kvaliteten och kvantiteten av studier inom avsnittet om manlig infertilitet revideras och förfinas data om spermatogenes. Förslagen från olika författare om normerna för ejakulatvolym, koncentration och motilitet hos spermier presenteras i tabellen.
| Författare | År | Volym, ml | Koncentration, mln/ml | Rörlighet, % |
|---|---|---|---|---|
| Davis | 1943 | fyra | 60 | 80 |
| Sharren | 1972 | 2 | 40 | 70 |
| Eliasson | 1981 | 2 | tjugo | femtio |
| Bustos-Obregon | 1981 | 1.5 | tjugo | 40 |
| Van Zyl | 1976 | 2 | tio | trettio |
| WHO:s standarder | 1999 | 2 | tjugo | femtio |
| WHO:s standarder | 2010 | 1.5 | arton | 32 |
I Sovjetunionen och för närvarande i Ryssland finns det inga speciella dokument från hälsoministeriet som fastställer normerna för fertil ejakulation. Medicinska institutioner har rätt att utvärdera fertiliteten hos ejakulatet enligt sina egna standarder. De standarder som föreslås av Världshälsoorganisationen (WHO) är mycket populära bland läkare . Prevalensen av WHO-standarder är så stor bland läkare att dessa standarder kan anses vara allmänt erkända för närvarande, och boken "WHO Guidelines for the laboratory study of human ejaculate and the interaction of spermatozoa with cervical mucus" är den mest auktoritativa publikationen om reglerna för genomförande av spermogram.
Den senaste utgåvan av WHO:s riktlinjer för laboratorietester av mänskligt utlösning och interaktion mellan spermier och livmoderhalsslem (Cambridge University Press, 1999) föreslår följande normativa indikatorer för fertilt utlösning:
| Index | Menande |
|---|---|
| Volym | 2 ml eller mer |
| pH | 7.2 eller mer |
| Spermiekoncentration | 20 miljoner/ml eller mer |
| Totalt antal spermier | 40 miljoner eller mer |
| Spermier rörlighet | 50 % eller mer i rörelse (Kategori A+B) eller 25 % eller mer progressiv (Kategori A) inom 60 minuter efter utlösning |
| Spermier livsduglighet | 50 % eller mer vid liv |
| Leukocytkoncentration | mindre än 1 miljon/ml |
| Antisperma antikroppar | mindre än 50 % av ACAT-associerade spermier detekterade av MAR eller ImunnoBeat |
WHO ger inga specifika rekommendationer angående normen för antalet spermier med normal morfologi, och påpekar det faktum att studier av normativa värden för spermier fortfarande pågår.
Under 2010 gjorde WHO nya ändringar av referensvärdena för ejakulationsindikatorer, vilket ändrade metoden för dess bearbetning och forskning. I den senaste, 5:e upplagan av "WHO laboratoriemanual för undersökning och bearbetning av mänsklig sperma", normerna för antalet och rörligheten av spermier, har antalet normala former av spermier ändrats. Så till exempel har klassificeringen av rörliga spermier avskaffats: enligt grupperna a, b, c, d. Istället föreslås en klassificering av spermier med progressiv rörelse, icke-progressiv rörelse och orörlig.
Nedan är normerna för utlösningsindikatorer, enligt de senaste WHO-rekommendationerna från 2010:
| Index | Menande |
|---|---|
| Ejakulationsvolym, ml | 1,5 ml eller mer |
| Totalt antal spermier, miljoner | 39 och uppåt |
| Spermiekoncentration, miljon i 1 ml | 15 eller fler |
| Total spermiemotilitet, % | 40 eller fler |
| Spermatozoer med progressiv rörelse, % | 32 eller fler |
| Viabilitet, % | 58 och uppåt |
| Morfologi: normala former, % | 4 eller fler |
Ejakulatet som motsvarar de accepterade normativa värdena kallas normalt och tillståndet för detta ejakulat betecknas med termen "normospermi" eller "normozoospermi".
WHO föreslår följande termer för att beskriva de patologiska tillstånden i ejakulatet:
Termerna "oligozoospermi", "asthenozoospermi" och "teratozoospermi" i närvaro av lämpliga avvikelser i ejakulatet kan kombineras till ett ord, till exempel: "oligoasthenoteratozoospermi", "astenoteratozoospermi", etc.
Dessutom är följande termer vanliga:
Ibland kan följande termer hittas:
Innan de donerar spermier för analys, rekommenderas män att avstå från sexuell aktivitet och onani i 2-7 dagar. Denna period rekommenderas för att standardisera villkoren för analysen, så att du kan jämföra resultaten som erhållits i olika laboratorier . Det rekommenderas också vanligtvis att undvika överdriven konsumtion av starka alkoholhaltiga drycker under 2-5 dagar (även om effekten av alkohol på spermiekvaliteten under denna period inte har visats). Under flera dagar före analysen bör besök i bastur , ångbad , termalbad och andra rum med mycket höga temperaturer också undvikas, eftersom höga temperaturer minskar spermiernas rörlighet.
Det vanligaste sättet att få sperma för analys är genom onani ; denna metod rekommenderas av WHO. Andra metoder har nackdelar. Sådana metoder inkluderar: coitus interruptus och användning av en speciell medicinsk kondom utan smörjning. Ejakulatet tas emot i en skål som erbjuds av den relevanta medicinska institutionen. Som regel används speciella sterila koppar för att samla flytande biologiska sekret ( urin , avföring ). Det är möjligt att få ett ejakulat utanför en sjukvårdsinrättning med efterföljande transport.
Normala spermier omedelbart efter utlösning är ett koagulat , eller helt enkelt en trögflytande vätska. Med tiden blir sperma flytande. Denna tidsperiod hänvisas till som "förtätningstiden". Vanligtvis flyter ejakulatet inom 15-60 minuter. Om ejakulatet inte flyter inom 1 timme, blir det som regel inte längre flytande alls.
Utlösningen av ejakulatet bestäms av den så kallade "längden på tråden". Ejakulatet berörs med en glas- eller plastpinne (pipett) och pinnen höjs över ejakulatytan; För att bestämma "längden på tråden" i modern medicin använder de ofta frisättningen av ejakulat från en 5 ml serologisk pipett. "Gänglängd" kännetecknar parametern "viskositet". Viskositet och förtunningstid är relaterade parametrar.
Viskositeten tillförs sperma av glykoproteinet semenogelin, som produceras i sädesblåsorna . Funktionerna av semenogelin är inte helt kända, det antas att det binder till ligander på ytan av spermatozoer och håller dem i ett inaktivt tillstånd. Under ejakulation blandas prostatajuice , som innehåller det så kallade " prostataspecifika antigenet ", med spermatozoer och sädesblåsorjuice . Detta proteolytiska enzym bryter ner semenogelin, vilket resulterar i sperma flytande och förmodligen gör spermatozoer aktiva (tillsammans med andra faktorer). Icke-vätskebildning av ejakulatet indikerar prostatadysfunktion.
Eftersom den ökade viskositeten hos ejakulatet kan påverka tillförlitligheten av mikroskopisk analys, bör ejakulat som inte har flytande inom 1 timme förvandlas till vätska på konstgjord väg med hjälp av proteolytiska enzymer (till exempel farmakopéiellt trypsin ).
Ejakulatvolymen mäts vanligtvis med en graderad serologisk pipett (samtidigt som viskositeten bestäms). I de flesta laboratorier anses en ejakulatvolym på mindre än 2 ml vara onormal, tillståndet för ett sådant ejakulat karakteriseras som "oligospermi". Huvudvolymen av ejakulatet ges av saften från sädesblåsorna (cirka två tredjedelar av volymen) och saften från prostatakörteln (cirka en tredjedel av volymen). Otillräcklig ejakulatvolym kan orsakas av retrograd ejakulation, dysfunktion, sädesblåsorhypoplasi, prostatadysfunktion, hypogonadism, obstruktion (helt eller delvis) av ejakulationskanalerna, en kort period av avhållsamhet från sexuell aktivitet innan donering av spermier för analys.
Ejakulatets surhet bestäms efter utspädning med hjälp av indikatorpapper eller en pH-mätare . WHO rekommenderar ett pH-värde på minst 7,2 som en normal indikator. Ejakulatet hos de flesta män har ett pH på 7,8-8,0.
Färgen på ejakulatet i modern medicin har inget allvarligt diagnostiskt värde, dess fixering på spermogramämnet är en hyllning till traditionen. Enligt traditionella idéer har ett normalt ejakulat en "vitaktig-gråaktig" färg, ibland karakteriseras det som "opaliserande", "molnigt vitt". Ett tydligt ejakulat kan (men inte nödvändigtvis) indikera ett lågt antal spermier i ejakulationen. Gulaktig eller rosa ejakulat är ibland förknippat med hemospermi. Det bör noteras att mikroskopisk analys exakt bestämmer antalet spermier och röda blodkroppar i sperman, så det finns inget behov av att fixa färgen på ejakulatet.
Vissa laboratorier fixar lukten av ejakulat. Den karakteriseras som "specifik" (i vissa föråldrade medicinska böcker (till exempel i "WHO Manual ...", 1991) jämförs den med lukten av kastanjeblommor). Lukten av ejakulat kommer från ämnet spermin som utsöndras av prostatakörteln. Spermins funktioner är okända. Vissa androloger använder lukten av ejakulat för att bedöma prostatakörtelns sekretoriska aktivitet, men det diagnostiska värdet av detta tillvägagångssätt är okänt.
Antalet spermier uttrycks i relativa termer ( koncentration eller kvantitet i 1 ml ejakulat) och i absoluta termer (total kvantitet i ejakulat ). Som regel används räknekammare för att bestämma antalet spermier - enheter som låter dig observera spermier i en viss volym vätska under ett mikroskop (detta låter dig bestämma antalet spermier i 1 ml, det vill säga koncentrationen , genom aritmetiska operationer). För att räkna spermier används antingen räknekammare för blodkroppar - hemacytomerer (" Goryaevs kammare ", "Neubauer" kammare), eller speciella räknekammare för spermier ("Maklers kammare", etc.). Det finns också metoder för snabba koncentrationer , som att räkna spermier på ett objektglas. Om en droppe på 10 µl spermier täcks med ett 22×22 täckglas, kommer antalet spermier i synfältet av ett mikroskop vid en förstoring av 400 gånger att vara ungefär lika med antalet miljoner spermier i 1 ml ejakulat. Det finns datoriserade system för att bestämma koncentrationen av spermier - de så kallade spermaanalysatorerna. En sådan enhet är ett mikroskop med en installerad videokamera och ett bildutvärderingssystem.
Med alla metoder för att bestämma antalet spermier erhålls först koncentrationsdata. Sedan, genom att multiplicera koncentrationen med volymen, erhålls data om det totala antalet spermier i ejakulatet. Enligt WHO har ett normalt ejakulat minst 20 miljoner spermier per 1 ml volym, eller minst 40 miljoner i total volym. Tillståndet i ejakulatet med färre spermier karakteriseras som "oligozoospermi".
Ibland är antalet spermier så litet att det inte kan uttryckas i en viss koncentration (till exempel såg läkaren bara ett fåtal spermier efter att ha undersökt mer än ett prov av ejakulat). I det här fallet talar man om "enstaka spermier i synfältet", "enkla spermier på preparatet" eller "enkla spermier i ejakulatet". Ibland kan spermier endast upptäckas genom att centrifugera sperman och undersöka sedimentet med ett mikroskop.
Enligt rörligheten delas spermier in i 4 kategorier: A, B, C och D:
| Kategori | namn | Rörelsekaraktäristik |
|---|---|---|
| Kategori A | Progressivt aktiv | Rör dig i en rak linje med en hastighet av minst 25 mikron/s (inom två sekunder täcker de ett avstånd som är lika med deras längd) |
| Kategori B | Går gradvis långsamt | Rör dig i en rak linje med en hastighet på mindre än 25 µm/s |
| Kategori C | Icke-progressiv rörlig | De rör sig antingen indirekt eller helt enkelt på plats |
| Kategori D | orörlig | orörlig |
Spermier av kategori A och B tros kunna nå ägget (spermier av kategori B kan ibland öka i hastighet efter kapacitation i slidan och livmoderhalsen). Andelen spermier av olika kategorier av rörlighet bestäms antingen på ett objektglas "med ögat", eller i en räknekammare eller med hjälp av en datoriserad spermaanalysator.
Enligt WHO:s förslag anses ejakulat normalt om minst ett av två villkor är uppfyllt: 1) om andelen spermier av rörlighetskategori A inte är mindre än 25 %, 2) eller om andelen spermier av mobilitetskategori A och B i summan är inte mindre än 50%. Tillståndet i ejakulatet som inte uppfyller dessa villkor karakteriseras som "astenozoospermi".
Analys av den morfologiska normaliteten hos spermier, eller helt enkelt "spermamorfologi" utförs med hjälp av ett mikroskop. Laboratorieläkaren bestämmer andelen spermier vars utseende motsvarar normen och andelen spermier med onormal morfologi. För analys används antingen inhemska spermier, eller så förbereds ett utstryk av sperma färgat på glas. Utstryket färgas med histologiska färgämnen, i det enklaste fallet med hematoxylin , i mer komplexa fall utförs komplex färgning enligt metoderna från Schorr, Papanicolaou eller Romanovsky-Giemsa .
Sperman innehåller alltid ett stort antal onormala spermier. Onormal morfologi kan relatera till huvudets struktur (onormal form, storlek, frånvaro eller reducerad akrosom ), strukturen på halsen och mittdelen (krökning, onormal storlek), flagellum (krökning, frånvaro eller multipla flageller, storlek). WHO ger inga entydiga rekommendationer om hur stor andel av onormala spermier som är acceptabelt i normal sperma. I 1992 års upplaga av "Guidelines ..." lades tonvikt på rekommendationen att studera morfologin i inhemskt ejakulat med hjälp av "ljusfält"-optik; med denna metod bör andelen onormala spermier inte överstiga 50 % i ett normalt ejakulat. 1999 års upplaga av WHO:s riktlinjer betonade rekommendationen att undersöka morfologi i naturligt ejakulat med "faskontrast"-optik; med denna metod bör andelen onormala spermier inte överstiga 70 % i ett normalt ejakulat. Men samma publikation rekommenderar också att man använder de så kallade "Strikta Krugerkriterierna" för att undersöka morfologi på ett färgat spermieutstryk. Enligt dessa kriterier (gäller endast utstryk) bör andelen onormala spermier inte överstiga 85 %. Sålunda beror fastställandet av normer för antalet onormala spermier på metoden för att bedöma spermatozoernas morfologi. Den mest exakta metoden är studien av ett fläckigt utstryk. Tillståndet i ejakulatet, som inte uppfyller standarderna för spermiemorfologi, karakteriseras som "teratozoospermi".
Spermatos livsduglighet kännetecknas av andelen levande spermier. Motila spermier är alltid vid liv. En orörlig sperma kan antingen vara levande, men med nedsatt rörelsefunktion, eller död. WHO föreslår som en livskraftsstandard - minst 50% av de levande av den totala. Således, om andelen rörliga spermier (kategori A, B, C) är 50 % eller mer, finns det inget behov av att genomföra en speciell livsduglighetsstudie. Denna parameter är vettig att undersöka med astenozoospermi. De två vanligaste metoderna för att bedöma livsdugligheten hos spermier. Båda metoderna är baserade på faktumet att integriteten hos cellens yttre membran kränks kort efter dess död:
Rundade eller runda celler kallas icke-flagellerade cellelement av spermier. Med andra ord, rundade celler är allt som inte är spermier. Detta kollektiva koncept inkluderar två grupper av celler av olika ursprung: leukocyter och de så kallade "omogna cellerna av spermatogenes". Konceptet med "rundade celler" dök upp eftersom det är omöjligt att skilja leukocyter från omogna spermatogenesceller i naturligt ejakulat med hjälp av ljusmikroskopi. Celler som är atypiska för ejakulatet (erytrocyter, epitelceller från sädesledaren etc.) klassificeras inte som "runda celler".
Den diagnostiska betydelsen av parametern "antal avrundade celler" är inte klar. Tidigare föreslog WHO en norm på högst 5 miljoner / ml, vilket motiverade det med det faktum att om antalet avrundade celler överstiger 5 miljoner / ml, är det troligt att innehållet av leukocyter kommer att överstiga normen (inte mer än 1 miljon/ml). Därefter avbröts normen "högst 5 miljoner / ml".
Omogna celler av spermatogenes kallas celler i den spermatogena serien, det vill säga prekursorerna till spermier. Dessa inkluderar spermatogoni, spermatocyter av första och andra ordningen och spermatider (se spermatogenes ). Ejakulatet innehåller alltid omogna spermatogenesceller, deras antal varierar mycket (vanligtvis 2-5 miljoner / ml, men kan nå flera tiotals miljoner i 1 ml). Uppenbarligen har antalet omogna spermatogenesceller inget diagnostiskt värde.
Enligt en vanlig synpunkt kan ett ökat innehåll av leukocyter i sperma indikera närvaron av inflammatoriska processer i de accessoriska könskörtlarna (prostatakörteln, sädesblåsor). Enligt WHO har ett normalt ejakulat inte mer än 1 miljon leukocyter per 1 ml. Tillståndet i ejakulatet med ett stort antal leukocyter karakteriseras som "leukocytospermi".
De allra flesta leukocyter i sperma representeras av neutrofila segmenterade granulocyter . De återstående typerna av leukocyter i normalt ejakulat är sällsynta, så metoderna för att detektera leukocyter syftar till att identifiera segmenterade granulocyter. I naturligt ofärgat ejakulat är det omöjligt att på ett tillförlitligt sätt skilja granulocyter från omogna spermatogenesceller. Den enklaste metoden för att upptäcka granulocyter är mikroskopi av ett färgat spermieutstryk. Det räcker med att behandla spermieutstryk med valfritt färgämne som färgar kärnan, till exempel hematoxylin . Runda celler med segmenterade kärnor definieras som granulocyter. Det finns också metoder för att färga granulocyter med hjälp av det så kallade "peroxidastestet" - ett färglöst substrat tillsätts till spermierna, som klyvs av peroxidas till en färgad produkt. Granulocyter innehåller peroxidas , bryter ner substratet och färgas gult.
Detekteringen av leukocyter är också viktig för att diagnostisera orsakerna till azoospermi . Obstruktiv azoospermi beror på obstruktion av sädesledaren, sekretorisk azoospermi beror på undertryckt spermatogenes. Med sekretorisk azoospermi är omogna spermatogenesceller vanligtvis närvarande i ejakulatet, med obstruktiv azoospermi saknas omogna spermatogenesceller (på grund av obstruktion av könsorganen). Om med azoospermi alla runda celler i ejakulatet bestäms som leukocyter, är sannolikheten för obstruktiv azoospermi hög.
Antisperma antikroppar [1] (ASAT) kallas antikroppar mot antigener från spermier. Sådana antikroppar kan produceras av både en mans kropp och en kvinnas kropp. Anledningen till utseendet är immunsystemets kontakt med spermier vid sjukdomar i könsorganen. Antispermantikroppar kan orsaka infertilitet av immunförsvar. Genom att binda till antigener på huvudet av spermierna kan antispermier blockera bindningsreceptorerna i spermien och ägget (spermatozoerna kan inte fästa vid äggcellsmembranet för att starta den akrosomala reaktionen). Genom att binda till antigener på spermatozoernas svans kan ASAT störa spermiernas rörelse. ACAT orsakar ökad DNA-fragmentering, patogenesen av patospermi i immun infertilitet är associerad med oxidativ stress.
Ett vanligt tecken på närvaron av ASAT i sperman är den så kallade "spermagglutineringen" - specifik limning av spermier, fastsättning av spermier till varandra. Spermagglutination bör särskiljas från den så kallade "spermaaggregation" - ospecifik agglutination på grund av närvaron av slem i sperman. Spermagregering är en variant av normen och har ingen klinisk betydelse. Under spermagglutination bildar rörliga spermier små bindningsgrupper - flera spermier håller ihop med samma delar av sin cell - "huvud mot huvud" eller "svans mot svans" eller "hals mot hals". Dessa bindningsgrupper hänvisas ibland till som "rosetter". Som regel är antalet rosetter litet - en för flera synfält av mikroskopet, men den kan också vara massiv. Rundade celler deltar inte i agglutination och ingår inte i "rosetterna". Under aggregation bildar spermier stora kluster (från tiotals till hundratals). Sådana kluster bildar ofta en "sträng"-form och inkluderar rundade celler.
Det finns immunkemiska metoder för att bestämma ASAT. Den vanligaste i modern laboratoriepraxis är MAR-metoden (Mixed Antiglobulin Reaction). I denna metod tillsätts en droppe av en suspension av silikonmikropartiklar bundna till kaninantikroppar mot mänskliga antikroppar till en droppe spermier på ett objektglas. Sådana partiklar binder till humana antikroppar. Om ASAT finns i sperman fastnar partiklarna på spermierna. I detta fall observeras spermier med fästa mikropartiklar i mikroskopets synfält. Om antalet spermier som bär mikropartiklar överstiger 50 %, dras en slutsats om förekomsten av "antispermaantikroppar" i sperman.