Ti-plasmid

Den aktuella versionen av sidan har ännu inte granskats av erfarna bidragsgivare och kan skilja sig väsentligt från versionen som granskades den 4 november 2021; verifiering kräver 1 redigering .

Ti-plasmid ( eng.  Ti plasmid från engelska  tumor inducing -  inducing the formation of tumors) är en plasmid av jordbakterien Agrobacterium tumefaciens , med vilken den orsakar tumörer i växter . Regionen av Ti-plasmiden, känd som T-DNA (från engelska  transfer DNA ), kan integreras i växtgenomet och innehåller gener för biosyntesen av fytohormoner och opiner , som utlöser tumörbildning [1] ] .

Byggnad

Ti-plasmiden är en cirkulär dubbelsträngad DNA - molekyl som består av 214 233  baspar (bp) och innehåller 199 gener. Plasmiden innehåller en 12 till 22 tusen bp region känd som T-DNA, som kan integreras i växtgenomet. Sex gener lokaliserade i T-DNA - iaaM1, iaaH2, ipt, tml6, 6a, 6b - är ansvariga för biosyntesen av opiner och vissa fytohormoner, och generna iaaM, iaaH2 och ipt är onkogener . Uttrycket av dessa gener utlöser bildandet av en tumör - en knöl på roten av en infekterad växt [1] .

Förutom T-DNA inkluderar Ti-plasmiden vir-regionen som representeras av virABCDEFG- operonet [2] . Vir-generna är ansvariga för att skära ut och överföra T-DNA till växtceller . VirA - genen kodar för en receptor ( histidinkinas ) som svarar på fenoliska föreningar som acetosyringon , syringaldehyd och apocynin [3] som frigörs från skadade växtceller . virB - genen kodar för pili -liknande proteiner , virC -genprodukten binder till sekvensen som ska överföras, och proteinerna som kodas av virD1- och virD2- generna är endonukleaser som känner igen direkta upprepningar i ändarna av T-DNA och gör skärningar i dessa regioner med deltagande av ett extra virD4-protein [4] . virE -genprodukten förmedlar den faktiska överföringen av T-DNA till växtcellen, och proteinet som kodas av virG -genen triggar uttrycket av vir-generna efter att det fosforylerats av det aktiverade virA-proteinet [5] [6] .

Ti-plasmiden innehåller också gener för opinbearbetning och tra-regionen, vilket ger konjugativ överföring av plasmiden mellan två bakterier [7] .

Infektion

Införandet av T-DNA i växtgenomet sker i fyra steg:

T-DNA kan komma in i växten endast på platsen för skadan på grund av de specifika egenskaperna hos virA-receptorn som beskrivs ovan. Dessutom påverkas penetrationen av miljöns surhet och temperatur . T-DNA:s penetration förmedlas av speciella T-högar, som är placerade i form av ett knippe tunna flexibla fibriller vid en av bakteriecellens poler. Utskärningen och integreringen av T-DNA i växtgenomet förmedlas av produkterna från vir-generna. Processen att överföra T-DNA till cytoplasman i en bakteriecell tar 30 minuter, och bakterien själv tar sig inte in i växtcellen, utan befinner sig i det intercellulära utrymmet och använder infekterade T-DNA-celler som leverantör av opiner, som fungerar som en källa till kol och kväve för bakterien. Induktionen av virulensgenuttryck involverar också specifika intracellulära växtmetaboliter som bildas under sårskador [8] .

Tillämpningar inom genteknik

Agrobacterium tumefaciens används aktivt inom genteknik för att skapa transgena växter på grund av dess förmåga att transformera växtceller, och den nödvändiga genen levereras till växtgenomet som en del av T-DNA [9] .

Anteckningar

  1. 1 2 Gigani, 2017 , sid. 91-92.
  2. Stachel SE , Nester EW Den genetiska och transkriptionella organisationen av vir-regionen av A6 Ti-plasmiden av Agrobacterium tumefaciens.  (engelska)  // The EMBO Journal. - 1986. - Juli ( vol. 5 , nr 7 ). - P. 1445-1454 . — PMID 3017694 .
  3. Lohrke SM , Yang H. , Jin S. Reconstitution of Acetosyringone-Mediated Agrobacterium tumefaciens Virulence Gene Expression in the Heterologous Host Escherichia coli  //  Journal of Bacteriology. - 2001. - 15 juni ( vol. 183 , nr 12 ). - P. 3704-3711 . — ISSN 0021-9193 . - doi : 10.1128/JB.183.12.3704-3711.2001 .
  4. Hamilton CM , Lee H. , Li PL , Cook DM , Piper KR , von Bodman SB , Lanka E. , Ream W. , Farrand SK . TraG från RP4 och TraG och VirD4 från Ti-plasmider ger relaxosomspecificitet till det konjugala överföringssystemet av pTiC58.  (engelska)  // Journal Of Bacteriology. - 2000. - Mars ( vol. 182 , nr 6 ). - P. 1541-1548 . — PMID 10692358 .
  5. Schrammeijer B. , Beijersbergen A. , Idler KB , Melchers LS , Thompson DV , Hooykaas PJ Sekvensanalys av vir-regionen från Agrobacterium tumefaciens octopine Ti-plasmid pTi15955.  (engelska)  // Journal Of Experimental Botany. - 2000. - Juni ( vol. 51 , nr 347 ). - P. 1167-1169 . — PMID 10948245 .
  6. Alexander N. Glazer, Hiroshi Nikaidō. Mikrobiell bioteknik: grunderna för tillämpad mikrobiologi  (engelska) . - Cambridge University Press , 2007. - ISBN 0-521-84210-7 .
  7. 1 2 Gigani, 2017 , sid. 92.
  8. Gigani, 2017 , sid. 92-93.
  9. Dale & Park, 2004 , sid. 241.

Litteratur